싸이티바(Cytiva)의 HyClone™ Serum은 엄격한 품질 기준을 바탕으로, FBS를 포함한 다양한 혈청을 제공하여 안정적인 세포 성장 환경을 지원합니다.
제품 특징
올바른 origin과 traceability를 보여줍니다.
International Serum Industry Association (ISIA)에 인증
Oritain사를 통한 추가적인 원산지 증명. 미국, 호주, 뉴질랜드산 FBS 각 Batch를 테스트합니다. 제품 표면에 붙어있는 Oritain 로고를 확인하세요.
• cGMP (21 CFR 820), ISO 9001, 유럽의약품기구 인증 생산
• 모든 생산 과정의 documentation
Lot별 표준화된 QC 테스트 및 품질 관리
Cytopathogenic agents
Electrophoresis profile
Endotoxin
Hemadsorbing agents
Hemoglobin
IgG
Mycoplasma
Osmolality
Protein testing
Sterility testing (bacteria & fungi)
Total protein
Trace metals / iron
USDA safety test (Australian origin only)
Virus testing (9 CFR 113.53)
• 3회 100 nm (pore size) filtration
• Lot-to-lot variation의 최소화로 일관된 quality의 제품 제공
• Filtering 이후 하나로 모아서 잘 섞은 후 제품 포장
대표 제품
Fetal Bovine Serum
Bovine Calf Serum
Other Species Serum
Characterized FBS
제품문의고품질의 fetal bovine serum으로 pore size 100 nm의 filter로 3회 filtration 하여, 엄격한 관리를 통해 생산됩니다.
| 제품 코드 | 제품명 |
| SH30919.03 | Characterized FBS, US |
| SV30207.02 | Characterized FBS, Australian |
| SH30406.02 | Characterized FBS, New Zealand |
Defined FBS
제품문의HyClone에서 제공하는 최고품질의 FBS로, 독점적인 방식의 serial 40nm filtration을 진행하여 virus의 위협을 줄여줍니다.
| 제품 코드 | 제품명 |
| SH31194.03 | Defined FBS, New Zealand |
Gamma Irradiation
제품문의Serum에 존재할 수도 있는 외래성 바이러스의 위험을 감소 시키기 위한 강력한 방법 입니다. 이 과정은 최소 조사량 25kGy를 만족합니다.
| 제품 코드 | 제품명 |
| SH30919.03IR25-40 | Characterized FBS, US (Irradiated) |
| SV30207.02IR30-40 | Characterized FBS, AUS (Irradiated) |
Heat Inactivation
제품문의혈청을 56℃의 온도에 30분 동안 노출시키는 열 불활성화는 일부 외래 인자를 줄이는데 효과적일 수 있습니다.
| 제품 코드 | 제품명 |
| SH30919.03HI | Characterized FBS, US (Heat Inactivated) |
Bovine Calf Serum
제품문의미국과 뉴질랜드 원산지의 BCS(송아지 혈청)입니다. 철분과 성장 촉진 요소가 보충된 혈청도 옵션으로 포함되어 있습니다.
| 제품 코드 | 제품명 |
| SH30073.03 | Bovine Calf Serum, US |
| SH30072.03 | Iron-Supplemented Bovine Calf Serum, US |
| SH30087.03 | Cosmic Calf Serum, US |
| SH30401.01 | Newborn Calf Serum, New Zealand |
| SH30626.02 | Iron-Supplemented Calf Serum, New Zealand |
| SH30413.02 | Cosmic Calf Serum, New Zealand |
Other Species Serum
제품문의Porcine Serum, New Zealand는 뉴질랜드에서 채취한 혈액을 미국으로 옮겨 200 nm 필터링 및 gamma irradiation (25 ~ 40 kGy)하여 생산됩니다. Donor Equine Serum은 영양 섭취가 잘된 말에서 혈청을 채취합니다. 지질 농도를 낮추기 위해서 일시적인 금식 후 무균 시설에서 채취합니다. 각 말은 말 감염성 빈혈 검사를 위해서 coggins 테스트를 진행합니다.
| 제품 코드 | 제품명 |
| SH30908.04 | Porcine Serum, New Zealand (Irradiated) |
| SH30074.03 | Donor Equine Serum, US |
유의 사항
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FBS 제품을 갑자기 바꾸게 될 경우, 세포가 죽거나 컨디션이 나빠질 수 있습니다. 그래서 기존 FBS에 바꿀 FBS를 섞어서 사용해야 하며, 단계적으로 바꿀 FBS의 비율을 높혀 줍니다.
열 불활성화 (Heat inactivation)는 1970년대 이전부터 시행된 방법으로 보체 불활성화 및 마이코플라스마 등 미생물 제거를 위해서 사용하기 시작하였습니다. 열 불활성화를 진행하는 연구자의 70% 정도는 단순히 실험 프로토콜에 포함되어 있기 때문이거나, 일반적으로 항상 필요하다고 생각되기에 열 불활성화를 진행합니다. 하지만 혈청 수집 및 처리 과정이 과거와는 달리 많은 부분 개선되었기 때문에, 이 과정이 필요했던 주요 이유들은 대부분 사라졌습니다.
보체
Triglia와 Linscott가 상업용 FBS에서 Conglutinin, C3b같은 9개의 보체 성분을 분석한 결과에 따르면, 세포배양에 영향을 줄만큼 충분한 양이 제품에 포함되어 있지 않음을 보여줍니다.
| 보체 종류 | 함유량 |
| Conglutinin, C1, C6 | 성체 혈청 수준의 1~3% |
| C3 | 검출 불가 |
| 그 외 나머지 보체들 | 성체 혈청 수준의 5~50% |
Heat inactivation에 따른 영향
| 세포주 종류 | 열 불활성화 혈청의 영향 |
| HBAE, Human foreskin fibroblast, MDBK, MRC‑5, Mv 1Lu, Vero | 악영향 (성장 감소) |
| CHO-K1, FOX‑NY hybrid, MDCK | 영향 받지 않음 |
| Balb/3T3, Sp2/0 Ag14 hybrid | 약간 향상됨 |
마이코플라즈마 (Mycoplasmas) 등 미생물 오염
초기 혈청 제품은 0.45μm 사이즈의 필터에 여과되어, 가끔 마이코플라즈마가 혈청이나 배지 제품에서 발견되는 경우가 있었습니다. 하지만 HyClone의 혈청 제품은 0.1μm 사이즈의 필터에 3번 연속 여과하여 생산하고 있기 때문에 열 불활성화가 굳이 필요 하지 않습니다.
Heat inactivation 온도, 시간 변화에 따른 영향
세포배양에 사용하는 FBS 및 여러 혈청 제품들 (Calf, Porcine, Equine Serum 등)에는 여러 종류의 침전물이 형성될 수 있습니다.
콜레스테롤의 지방 에스테르나 일부 단백질으로 구성된 침전물 외에도 피브린과 인산칼슘으로 인한 침전물 형성도 일반적입니다.
이런 침전물은 연구자의 우려와 달리, 세포배양에서 혈청의 성능에 영향을 주지 않습니다.
콜레스테롤의 지방 에스테르나 일부 단백질으로 구성된 침전물 외에도 피브린과 인산칼슘으로 인한 침전물 형성도 일반적입니다.
이런 침전물은 연구자의 우려와 달리, 세포배양에서 혈청의 성능에 영향을 주지 않습니다.
주요 침전물 형태
| 보체 종류 | 형태 |
| 피브린 (Fibrin)* | 1-2mm 까지의 눈에 보이는 크기의 침전물 형성 |
| 인산칼슘 (Calcium Phosphate) | 혈청을 혼탁하게 만드는 형태 도립현미경으로 관찰할 때,• 작고 검은 점으로 관찰되며,• 브라운 운동으로 인해서 움직이기 때문에 미생물 오염으로 오해할 수 있음 |
*피브린 : 혈액응고과정을 유발하는 단백질. 전구체인 피브리노겐 (fibrinogen) 으로 존재하다가 응고 과정이 시작되면 피브린으로 변형됨
침전물 증가의 다양한 원인
- 혈청의 열 불활성화 처리
- 37℃에서의 장시간 warming
- 동결 및 해동 과정의 반복
- 내용물을 섞지 않은 상태로 해동
- 감마선 조사
- 2℃ ~ 8℃에서 장기 보관
- 자동 서리제거 기능이 있는 냉장고에서 보관
인산칼슘 침전물일까? 미생물 오염일까?
침전물인지 미생물 오염인지 확인하고자 할 경우, 미생물이 자랄 수 있는 한천 배지(LB 배지)를 준비합니다. 오염이 의심되는 혈청을 1mL 정도 도말하고, 37℃에 배양합니다. 미생물의 콜로니가 형성되는지 여부를 관찰하여 오염을 확인합니다. 혹은 그람염색법을 사용하여 오염 여부를 확인할 수 있습니다.
재여과 (Re-filtration)
일반적으로 Hyclone은 세포배양을 위한 혈청의 재여과 과정을 권장하지 않습니다. 이미 100 nm 혹은 40 nm 사이즈 필터로 1~3회 여과하여 생산되었기 때문에 일반적인 실험실 환경에서는 다시 여과할 필요가 없습니다.